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產品名稱:土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒

產品型號:BC0270

產品報價:

產品特點:土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒
測定意義:土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化,其水解產物是高等植物的氮源之一。S-NPT在中性環(huán)境下催化蛋白質水解,與土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關。

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BC0270土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒的詳細資料:

土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒

土壤中性蛋白酶活性檢測試劑盒說明書
微量法

產地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓
英文名稱:Soil neutral protease activity detection kit
產品商標:solarbio

注意:正式測定之前選擇2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
貨號:BC0275
規(guī)格:100T/48S
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存;            
參考價格:1380
庫存狀態(tài):現貨
關鍵詞:土壤中性蛋白酶|土壤中性蛋白酶活性檢測|蛋白酶活性檢測
產品內容
試劑一:液體20mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入10mL試劑一,沸水浴攪拌溶解后待用;
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入10mL 蒸餾水充分溶解待用;
試劑四:液體20mL×1 瓶,4℃保存;
試劑五:液體5mL×1 瓶,4℃保存;
標準品:液體1mL×1 支,0.2 μmol/mL 酪氨酸溶液,4℃保存。

產品說明:
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化,其水解產物是高等植物的氮源之一。土壤中性蛋白酶在中性環(huán)境下催化蛋白質水解,與土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關。中性條件下,土壤中性蛋白酶可將酪蛋白水解產生酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍,在680nm 有特征吸收峰。

實驗中所需儀器及設備:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液槍、微量比色皿/96孔板、甲苯、蒸餾水、50目篩(或更?。?。

樣品處理:
新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干,過30~50 目篩。

操作步驟:
1、分光光度計/酶標儀預熱30min 以上,調節(jié)波長680nm,蒸餾水調零。
2、樣本測定:
試劑名稱         測定管               對照管         標準管              空白管
風干土樣(g)      0.05                 0.05            -                   -
試劑一(μL)       50                   50             -                   -
試劑二(μL)       100                                 -                   -
                  混勻后,37℃反應24h,期間振蕩5-6 次,使土樣與反應液充分接觸。
試劑三(μL)       100                  100            -                   -
試劑二(μL)        -                   100            -                   -
                           混勻,10000rpm 室溫離心10min,取上清液
上清液(μL)         44                   44            -                   -
標準液(μL)         -                    -             44                  -
蒸餾水(μL)         -                    -             -                  44
試劑四(μL)        130                  130            130               130
試劑五(μL)         26                   26             26                26

混勻,40℃水浴10min,10000rpm 室溫離心10min,取上清液于680nm 下讀取各管吸光值A,分別記為A 測定管、A 對照管、A 標準管、A 空白管,計算ΔA 測定=A 測定管-A 對照管,ΔA 標準=A 標準管-A 空白管。

注意:標準管、空白管只需測一次。每個測定管設一個對照管。

土壤中性蛋白酶活性計算:
單位定義:每天每g土樣中產生1μmol 酪氨酸為一個土壤中性蛋白酶活力單位。土壤中性蛋白酶(U/g)=C標準×ΔA測定÷ΔA標準×V 反總÷W÷T= 0.05×ΔA測定÷ΔA標準÷W。
C 標準管:標準管濃度,0.2 μmol/mL;
V 反總:反應體系總體積,0.25mL;
T:反應時間,1d;
W:樣本質量,g。

注意事項:
1、當吸光值大于1.5時,建議將上清液稀釋后進行測定,計算時注意乘以稀釋倍數。
 

 相關文獻:

《Evaluating the effects of phytoremediation with biochar additions on soil nitrogen mineralization enzymes and fungi》 作者:Manyun Zhang,Jun Wang, Shahla Hosseini Bai, Ying Teng,Zhihong Xu 期刊:Environmental Science and Pollution Research 影響因子:2.914 PMID:29860689

 

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