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谷氨酸(Glu)含量檢測(cè)試劑盒

谷氨酸提取： 1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞樣品：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；8000g 常溫離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 2、組織樣品：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 試劑一），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 常溫離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 3、血清（漿）或細(xì)胞培養(yǎng)液樣品：按照血清（漿）或細(xì)胞培養(yǎng)液體積（mL）：試劑一體積 (mL)為 1：5~10 的比例（建議取 0.1mL 血清（漿）或者細(xì)胞培養(yǎng)液加入 1mL 試劑一），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 常溫離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

谷氨酸(Glu)含量檢測(cè)試劑盒

谷氨酸含量計(jì)算： a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下 1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為 y = 0.0328x- 2.423； x 為谷氨酸含量（µg/mL），y 為吸光值。 2、按照血清（漿）或者細(xì)胞培養(yǎng)液體積計(jì)算谷氨酸含量(μg/mL)= [(△A +2.423)÷0.0328×V1]÷(V3×V1÷V2）=304.9×(△A+2.423) 3、按照蛋白濃度計(jì)算谷氨酸含量(µg/mg prot)=[(△A +2.423)÷0.0328×V1]÷(V1×Cpr)=30.49×(△A+2.423) ÷Cpr 4、按照樣本質(zhì)量計(jì)算谷氨酸含量(µg/g 鮮重)=[(△A +2.423)÷0.0328×V1]÷(W ×V1÷V2)=61×(△A+2.423) ÷W 5、按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算谷氨酸含量(μg/104 cell)=[(△A +2.423)÷0.0328×V1]÷(1000×V1÷V2)=0.061×(△A+2.423) V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.25mL；V2：加入提取液體積，1 mL；V3：加入血清（漿）或細(xì)胞培養(yǎng)液體積，0.1 mL； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500 萬(wàn)。 b.用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下 1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為 y = 0.0164x- 2.423； x 為谷氨酸含量（µg/mL），y 為吸光值。 2、按照血清（漿）或者細(xì)胞培養(yǎng)液體積計(jì)算谷氨酸含量(μg/mL)= [(△A +2.423)÷0.0164×V1]÷(V3×V1÷V2）=609.8×(△A+2.423) 3、按照蛋白濃度計(jì)算谷氨酸含量(µg/mg prot)=[(△A +2.423)÷0.0164×V1]÷(V1×Cpr)=60.98×(△A+2.423) ÷Cpr 4、按照樣本質(zhì)量計(jì)算谷氨酸含量(µg/g 鮮重)= [(△A +2.423)÷0.0164×V1]÷(W ×V1÷V2)=60.98×(△A+2.423) ÷W 5、按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算谷氨酸含量(μg/104 cell)=[(△A +2.423)÷0.0164×V1]÷(500×V1÷V2)=0.122×(△A+2.423) V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.25mL；V2：加入提取液體積，1 mL；V3：加入血清（漿）或細(xì)胞培養(yǎng)液體積，0.1 mL； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500 萬(wàn)。

Glu 廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，不僅是組成蛋白質(zhì)的 20 種氨基酸之一，而且通過轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成，是生物體內(nèi)主要氨基來(lái)源之一。此外，Glu 還是味精的主要有效成分，常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn)。

相關(guān)文獻(xiàn):

《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang，Chengzhen Liang，Zhigang Meng，Yanyan Li，Muhammad Ali Abid，Muhammad Askari，Peilin Wang，Yuan Wang，Guoqing Sun，Yongping Cai，Shou-Yi Chen，Yi Lin，Rui Zhang，Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID: