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產(chǎn)品名稱:谷氨酰胺合成酶(GS)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品型號:BC0910

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點(diǎn):谷氨酰胺合成酶(GS)活性檢測試劑盒
測定意義:GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不僅可以防止過多的銨離子對生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要儲存和運(yùn)輸形式。
測定原理:GS 在ATP 和Mg2+存在下,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨?;惲u肟酸,在酸性條件下與鐵形成紅色的絡(luò)合物;該絡(luò)合物在5

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BC0910谷氨酰胺合成酶(GS)活性檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

谷氨酰胺合成酶(GS)活性檢測試劑盒

 

產(chǎn)品名稱: 谷氨酰胺合成酶(GS)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名: Glutamine Synthetase(GS)Assay Kit

產(chǎn)品貨號:BC0910            產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣         產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存;            參考價格:360
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:   谷氨酰胺合成酶檢測試劑盒|GS檢測試劑盒|谷氨酰胺合成酶|試劑盒

簡要介紹:
GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不僅可以防止過多的銨離子對生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要儲存和運(yùn)輸形式。
    GS 在ATP 和Mg2+存在下,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨?;惲u肟酸,在酸性條件下與鐵形成紅色的絡(luò)合物;該絡(luò)合物在540nm 處有大吸收峰,可用分光光度計測定。


產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體30mL×1 瓶,4℃保存。
    試劑一:液體10mL×1 瓶,-20℃保存。
    試劑二:液體10mL×1 瓶,-20℃保存。
    試劑三: 粉劑×2 瓶,-20℃保存。用時每瓶加入5mL蒸餾水充分溶解備用,用不完的試劑仍-20℃保存。
    試劑四:液體15mL×1 瓶,4℃保存。

產(chǎn)品說明:
GSEC 6.3.1.2主要存在于植物中,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不僅可以防止過多的銨離子對生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要儲存和運(yùn)輸形式。
    GS ATP Mg2+存在下,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨?;惲u肟酸,在酸性條件下與鐵形成紅色的絡(luò)合物;該絡(luò)合物在540nm 處有大吸收峰,可用分光光度計測定。
實驗需自備的儀器和用品:
 可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣品測定的準(zhǔn)備 

  1. 細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個):提取液體積(mL)為500~10001 的比例(建議500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL 提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30 次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例(建議稱取約0.1g 組織,加入1mL 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

  1. 血清(漿)樣品:直接檢測。
  2. 測定操作表
  3. 分光光度計預(yù)熱30min 以上,調(diào)節(jié)波長540nm,蒸餾水調(diào)零。
  4. EP 管中加入下列試劑:
試劑名稱(μL測定管對照管
試劑一320 
試劑二 320
試劑三140140
樣本140140
混勻,37℃(哺乳動物)或25℃(其他物種)準(zhǔn)確水浴30min
試劑四200200

混勻,靜置10min 后,5000g,常溫離心10min,取上清液測定540nm 處的吸光值A?!?/span>A=A測定管-A 對照管。每個測定管需設(shè)一個對照管。


三、計算
GS 活力單位的計算

  1. 血清(漿)GS 活性

單位定義:每mL 血清(漿)在每mL 反應(yīng)體系中每min 使540 下吸光值變化0.01 定義為一個酶活力單位。
計算公式:GSU/mL=ΔA×V 反總÷V ÷0.01÷T =19×ΔA

  1. 組織、細(xì)菌或細(xì)胞GS 活性
  2. 按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg 組織蛋白在每mL 反應(yīng)體系中每min 使540nm 下吸光值變化0.01 定義為一個酶活力單位。
GSU/mg prot)=ΔA×V 反總÷Cpr×V 樣)÷0.01÷T =19×ΔA÷Cpr

  1. 按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g 組織在每mL 反應(yīng)體系中每min 使540nm 下吸光值變化0.01 定義為一個酶活力單位。
GSU/g 鮮重)=ΔA×V 反總÷(W× V ÷V 樣總)÷0.01÷T =19×ΔA÷W

  1. 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算

單位定義:每1 萬個細(xì)菌或細(xì)胞在每mL 反應(yīng)體系中每min 使540nm 下吸光值變化0.01 定義為一個酶活力單位。
GSU/104 cell)=ΔA×V 反總÷(500×V ÷V 樣總)÷0.01÷T =0.038×ΔA
V 反總:反應(yīng)體系總體積,0.8mL V 樣:加入樣本體積,0.14mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,30 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mLW:樣本質(zhì)量,g500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬。

相關(guān)文獻(xiàn):
《Possible roles of?glutamine synthetase in?responding to?environmental changes in?a?scleractinian coral》 作者:Yilu?Su,Zhi?Zhou,Xiaopeng?Yu 期刊:Molecular Biology Reports  影響因子:2.107 PMID:
《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:30558146
《Ammonium Nitrogen Tolerant Chlorella Strain Screening and Its Damaging Effects on Photosynthesis》 作者:Jie Wang, Wei Zhou,Hui Chen,Jiao Zhan, Chenliu He,and Qiang Wang 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:4.259 PMID:30666245
《Modulating plant growth–metabolism coordination for sustainable agriculture》 作者:Shan Li, Yonghang Tian, Kun Wu, Yafeng Y, Jianping Yu, Jianqing Zhang, Qian Liu, Mengyun Hu, Hui Li, Yiping Tong,Nicholas P. Harberd4 & Xiangdong Fu 期刊:Nature 影響因子:43.07 PMID:30111841

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