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產(chǎn)品名稱:谷氨酸合成酶(GOGAT)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品型號:BC0075

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:谷氨酸合成酶(GOGAT)活性檢測試劑盒
測定意義:GOGAT廣泛分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同構(gòu)成GS/GOGAT循環(huán),參與氨同化的調(diào)控。
測定原理:GOGAT催化谷氨酰胺的氨基轉(zhuǎn)移到α-酮戊二酸,形成兩分子的谷氨酸;同時NADH氧化生成NAD+,340nm吸光度的下降速率可以反映GOGAT活性大小。

免費咨詢:010-50973130

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BC0075谷氨酸合成酶(GOGAT)活性檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

谷氨酸合成酶(GOGAT)活性檢測試劑盒

粗酶液提?。杭?xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟: 1、 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長 340nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 樣本測定(1)在試劑二中加入 18mL 試劑一充分溶解混勻,置于 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)水浴 5min;現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入20μL樣本和180μL試劑二,混勻,立即記錄340nm 處 20s 時的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值 A2,計算 ΔA=A1-A2。

 

GOGAT 活性計算:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計算:單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。 GOGAT(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109 ]÷(V 樣×Cpr) ÷T=321×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算:單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。 GOGAT(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109 ]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=321×ΔA÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算:單位的定義:每 1 萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。 GOGAT(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109 ]÷(500×V 樣÷V 樣總) ÷T=0.642×ΔA V 反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.02 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬。

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

1)按樣本蛋白濃度計算:單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。 GOGAT(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109 ]÷(V 樣×Cpr) ÷T=643×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算:單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。 GOGAT(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109 ]÷(W× V 樣÷V 樣總) ÷T=643×ΔA÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算:單位的定義:每 1 萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。 GOGAT(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109 ]÷(500×V 樣÷V 樣總)÷T=1.286×ΔA V 反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d: 96 孔板光徑,0.5cm;V 樣:加入樣本體積,0.02 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬。

谷氨酸合成酶(GOGAT)活性檢測試劑盒

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;試劑一:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;

相關(guān)文獻(xiàn):

《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:30558146
《Ammonium Nitrogen Tolerant Chlorella Strain Screening and Its Damaging Effects on Photosynthesis》 作者:Jie Wang, Wei Zhou,Hui Chen,Jiao Zhan, Chenliu He,and Qiang Wang 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:4.259 PMID:30666245
《Altered gut microbiota and mucosal immunity in patients with schizophrenia.》 作者:Ruihuan Xua,Bingbing Wu,Jingwen Liang,Fusheng He,Wen Gu,Kang Li,Yi Luo,Jianxia Chen,Yongbo Gao,Ze Wu,Yongqiang Wang,Wenhao Zhou,Mingbang Wang 期刊:Brain Behav. Immun. 影響因子:6.17 PMID:31255682
 

北京索萊寶科技有限公司是一家從事生物學(xué)試劑及試劑盒的高科技生物企業(yè)。

總部位于北京,并在全國設(shè)有經(jīng)銷或代理機(jī)構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“Solarbio”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念,擁有專業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量檢測團(tuán)隊以及的倉儲和物流系統(tǒng)。“Solarbio”已經(jīng)得到全國科研工作者的認(rèn)可,成為廣大經(jīng)銷商推崇的。

公司擁有一批專業(yè)的研發(fā)人員,我們專注于生物產(chǎn)品的不斷完善和創(chuàng)新。產(chǎn)品覆蓋面廣,品質(zhì)可靠。先后開發(fā)了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒。同時,索萊寶公司提供各種常規(guī)生化試劑,庫存常備產(chǎn)品多達(dá)10000多種,可隨時為廣大科研工作者提供各類專業(yè)試劑。在質(zhì)量方面,索萊寶謹(jǐn)記公司信念:質(zhì)量高于一切。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設(shè)有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)纳a(chǎn)流程,科學(xué)的質(zhì)量檢測方法和成熟的質(zhì)量檢測程序,我們恪守對每一位用戶的承諾:用專業(yè)的態(tài)度做專業(yè)的品牌。同時,公司組建了一支專業(yè)的技術(shù)服務(wù)隊伍,能夠為科研工作者提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)。每一位購買索萊寶產(chǎn)品的用戶都能夠得到專業(yè)的咨詢和完善的售后服務(wù)。

索萊寶公司堅持與接軌,注重和企業(yè)的合作與交流,并提供產(chǎn)品代理、市場咨詢等多項服務(wù)。公司將一如既往與世界更多合作,不斷為廣大生物科研工作者提供更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)。公司理念:“為科研服務(wù),為生命盡責(zé)”。一個人能夠走多遠(yuǎn),取決于與誰同行。索萊寶公司期待與各同行精誠合作。

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