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谷氨酸合成酶(GOGAT)活性檢測試劑盒

粗酶液提?。杭毦蚺囵B(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

測定步驟： 1、 分光光度計或酶標儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長 340nm，蒸餾水調(diào)零。

2、 樣本測定（1）在試劑二中加入 18mL 試劑一充分溶解混勻，置于 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）水浴 5min；現(xiàn)配現(xiàn)用；（2）在微量石英比色皿或96孔板中加入20μL樣本和180μL試劑二，混勻，立即記錄340nm 處 20s 時的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值 A2，計算 ΔA=A1-A2。

GOGAT 活性計算：

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

（1）按樣本蛋白濃度計算：單位的定義：每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。 GOGAT（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109 ]÷(V 樣×Cpr) ÷T=321×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算：單位的定義：每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。 GOGAT（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109 ]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=321×ΔA÷W

（3）按細菌或細胞密度計算：單位的定義：每 1 萬個細菌或細胞每分鐘消耗 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。 GOGAT（nmol/min/104 cell）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109 ]÷(500×V 樣÷V 樣總) ÷T=0.642×ΔA V 反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：NADH 摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V 樣：加入樣本體積，0.02 mL；V 樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細菌或細胞總數(shù)，500 萬。

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

1）按樣本蛋白濃度計算：單位的定義：每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。 GOGAT（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109 ]÷(V 樣×Cpr) ÷T=643×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算：單位的定義：每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。 GOGAT（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109 ]÷(W× V 樣÷V 樣總) ÷T=643×ΔA÷W

（3）按細菌或細胞密度計算：單位的定義：每 1 萬個細菌或細胞每分鐘消耗 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。 GOGAT（nmol/min/104 cell）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109 ]÷(500×V 樣÷V 樣總)÷T=1.286×ΔA V 反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：NADH 摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d： 96 孔板光徑，0.5cm；V 樣：加入樣本體積，0.02 mL；V 樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細菌或細胞總數(shù)，500 萬。

谷氨酸合成酶(GOGAT)活性檢測試劑盒

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；試劑一：液體 20mL×1 瓶，4℃保存；試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；

相關(guān)文獻：

《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:30558146
《Ammonium Nitrogen Tolerant Chlorella Strain Screening and Its Damaging Effects on Photosynthesis》 作者:Jie Wang, Wei Zhou,Hui Chen,Jiao Zhan, Chenliu He,and Qiang Wang 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:4.259 PMID:30666245
《Altered gut microbiota and mucosal immunity in patients with schizophrenia.》 作者:Ruihuan Xua,Bingbing Wu,Jingwen Liang,Fusheng He,Wen Gu,Kang Li,Yi Luo,Jianxia Chen,Yongbo Gao,Ze Wu,Yongqiang Wang,Wenhao Zhou,Mingbang Wang 期刊:Brain Behav. Immun. 影響因子:6.17 PMID:31255682
 

北京索萊寶科技有限公司是一家從事生物學試劑及試劑盒的高科技生物企業(yè)。

總部位于北京，并在全國設(shè)有經(jīng)銷或代理機構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“Solarbio”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念，擁有專業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量檢測團隊以及的倉儲和物流系統(tǒng)。“Solarbio”已經(jīng)得到全國科研工作者的認可，成為廣大經(jīng)銷商推崇的。

公司擁有一批專業(yè)的研發(fā)人員，我們專注于生物產(chǎn)品的不斷完善和創(chuàng)新。產(chǎn)品覆蓋面廣，品質(zhì)可靠。先后開發(fā)了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、生物醫(yī)學等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒。同時，索萊寶公司提供各種常規(guī)生化試劑，庫存常備產(chǎn)品多達10000多種，可隨時為廣大科研工作者提供各類專業(yè)試劑。在質(zhì)量方面，索萊寶謹記公司信念：質(zhì)量高于一切。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設(shè)有嚴謹?shù)纳a(chǎn)流程，科學的質(zhì)量檢測方法和成熟的質(zhì)量檢測程序，我們恪守對每一位用戶的承諾：用專業(yè)的態(tài)度做專業(yè)的品牌。同時，公司組建了一支專業(yè)的技術(shù)服務(wù)隊伍，能夠為科研工作者提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)。每一位購買索萊寶產(chǎn)品的用戶都能夠得到專業(yè)的咨詢和完善的售后服務(wù)。

索萊寶公司堅持與接軌，注重和企業(yè)的合作與交流，并提供產(chǎn)品代理、市場咨詢等多項服務(wù)。公司將一如既往與世界更多合作，不斷為廣大生物科研工作者提供更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)。公司理念：“為科研服務(wù)，為生命盡責”。一個人能夠走多遠，取決于與誰同行。索萊寶公司期待與各同行精誠合作。

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索萊寶公司堅持與接軌，注重和企業(yè)的合作與交流，并提供產(chǎn)品代理、市場咨詢等多項服務(wù)。公司將一如既往與世界更多合作，不斷為廣大生物科研工作者提供更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)。公司理念：“為科研服務(wù)，為生命盡責”。一個人能夠走多遠，取決于與誰同行。索萊寶公司期待與各同行精誠合作。