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產(chǎn)品名稱:Solarbio 通用RT-PCR試劑盒(AMV)

產(chǎn)品型號:RP1200

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:Solarbio 通用RT-PCR試劑盒(AMV)
本試劑盒適用于各種 RNA制品的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)以及隨后的PCR擴增。它采用AMV進行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),能夠獲得更長的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。同時,在20ul反轉(zhuǎn)錄體系和50ul PCR反應(yīng)體系中,還可以一次性得到足夠量的PCR產(chǎn)物用于后續(xù)的克隆實驗。本試劑盒中配置的酶均為進口的酶。RT酶采用進口的AMV,所以cDNA更長,基因的信息保留得更完整!反轉(zhuǎn)錄過程中特異的R

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RP1200Solarbio 通用RT-PCR試劑盒(AMV)的詳細資料:

Solarbio 通用RT-PCR試劑盒(AMV)
產(chǎn)品簡介:本試劑盒適用于各種 RNA 制品的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)以及隨后的 PCR 擴增。它采用 AMV 進行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),能夠獲得更長的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。同時,在 25ul 反轉(zhuǎn)錄體系和 50ul PCR 反應(yīng)體系中,還可以一次性得到足夠量的 PCR 產(chǎn)物用于后續(xù)的克隆實驗。本試劑盒中配置的酶均為進口的酶。RT 酶采用進口的 AMV,所以 cDNA 更長,基因的信息保留得更完整!反轉(zhuǎn)錄過程中特異的 RNase 抑制劑可有效降低由于外源 RNase 污染而導(dǎo)致實驗失敗的風(fēng)險。本試劑盒使用方便、快捷,可廣泛用于 cDNA 克隆及目的基因檢測等分子生物學(xué)實驗。

Solarbio 通用RT-PCR試劑盒(AMV)
操作步驟:

一、反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)

1、在冰浴的無菌無 RNase 的離心管中加入如下反應(yīng)成分: 0.5ug RNA 模板 5ul Oligo(dT)16引物補 RNase-free ddH2O 11.5ul

2、70℃保溫 5min 后迅速在冰上冷卻 5min,簡短離心收集反應(yīng)液后加入以下各組分: 5ul 5×AMV Buffer 2.5ul dNTPs 0.5ul RNasin 0.5ul AMV 補 RNase-free ddH2O 25ul

3、42℃溫浴 60min,如果是用隨機引物,請將離心管置 37℃溫浴 60min。

4、反應(yīng)后將離心管置冰上,反應(yīng)產(chǎn)物可用于進行后續(xù)實驗或-20℃保存。

二、PCR 反應(yīng)

1、按以下各組分配制 50ul PCR 反應(yīng)體系: 10×PCR Buffer 5ul dNTPs 1ul 上游引物(用戶自備 10um) 1ul 下游引物(用戶自備 10um) 1ul RT 反應(yīng)產(chǎn)物 2ul Taq Polymerase 0.5ul ddH2O x ul Total Volume 50ul

2、混勻后短暫離心,PCR 儀擴增,瓊脂糖凝膠電泳觀察結(jié)果。

注意事項:

1、用于 cDNA 合成反應(yīng)的相關(guān)試劑和耗材盡可能用 DEPC 進行處理,并在高壓滅菌后使用。有些試劑不能高壓滅菌時,先用經(jīng)過滅菌的器具、水等配制溶液后,再將溶液進行過濾除菌處理。

2、RNA 樣品要避免反復(fù)多次凍融,應(yīng)使 RNA 在冰浴中處于融化狀態(tài)。

3、如果 PCR 效果不理想,可以適當優(yōu)化條件,比如改變退火溫度或增加模板量。


 

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