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產(chǎn)品名稱:丙酮酸脫羧酶(PDC)活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品型號(hào):BC1070

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):丙酮酸脫羧酶(PDC)活性檢測(cè)試劑盒
丙酮酸脫羧酶(PDC)測(cè)試盒,PDC以丙酮酸為底物催化 NADH 氧化生成NAD+;通過測(cè)定NADH的減少量,可計(jì)算出PDC活性。

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BC1070丙酮酸脫羧酶(PDC)活性檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

丙酮酸脫羧酶(PDC)活性檢測(cè)試劑盒

注意:正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。
貨號(hào): BC1070
規(guī)格: 50T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 36mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 20mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1 瓶,﹣20℃保存。
試劑四:粉劑×1 瓶,﹣20℃保存。
混合試劑:臨用前配制,將試劑三和試劑四用適量試劑二溶解后再全部轉(zhuǎn)移到試劑二中備用。
試劑五:液體 5mL×1 瓶,4℃保存。

產(chǎn)品說明:
PDC 主要存在于酵母中,是乙醇發(fā)酵的關(guān)鍵酶之一,催化丙酮酸脫羧生成乙醛。
PDC 催化丙酮酸脫羧生成乙醛,添加乙醇脫氫酶(ADH)來(lái)進(jìn)一步催化 NADH 還原乙醛生成乙醇和 NAD+;NADH 在 340 nm 有吸收峰,而 NAD+沒有;通過測(cè)定 340 nm 光吸收下降速率,來(lái)計(jì)算PDC 活性。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:
臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、1mL 石英比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。

操作步驟:
一、粗酶液提取:
1、細(xì)胞或微生物樣品的制備:
先收集細(xì)胞或微生物樣品到離心管內(nèi),棄上清,按照每 500 萬(wàn)細(xì)胞或微生物加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率 20%,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次)。10000rpm,4℃離心 20min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、組織樣品:
稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液,冰上充分研磨。16000g 4℃離心 20min,取上清,置冰上待測(cè)。
3、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
二、測(cè)定步驟:
1、 紫外分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng) 340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 試劑一 37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其他物種)水浴提前預(yù)熱 30min。

相關(guān)文獻(xiàn):

《Efficient metabolic evolution of engineered Yarrowia lipolytica for succinic acid production using a glucose-based medium in an in situ fibrous bioreactor under low-pH condition》 作者:Chong Li, Shi Gao, Xiaotong Li, Xiaofeng Yang & Carol Sze Ki Lin  期刊:Biotechnology for Biofuels 影響因子:5.452 PMID:

丙酮酸脫羧酶(PDC)活性檢測(cè)試劑盒

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