久久婷婷久久一区二区三区,欧美三级韩国三级日本三斤,久久精品无码一区二区无码,亚州av综合色区无码一区

歡迎來北京索萊寶科技有限公司!我們將為您提供周到的服務(wù)!
產(chǎn)品分類Product categories
首頁 > 技術(shù)文章 > 免疫組化各步驟中應(yīng)注意事項
免疫組化各步驟中應(yīng)注意事項

免疫組化,是應(yīng)用免疫學基本原理即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學反應(yīng)使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進行定位、定性及定量的研究。在免疫組化試驗中應(yīng)該注意以下事項。

1 .固定 :好用4%的多聚甲醛固定液。對于冰凍切片,甲醛固定有時比冰凍丙酮好;但對于不同的組織和抗原 ,可選用不同的固定液。 有時候商品化的抗體會有比較適合而推薦的固定液,請于購置前注意說明書。

Bouin S固定液:飽和750ml,甲醛250ml,冰醋酸50ml,其對組織的穿透力較強,固定較好,結(jié)構(gòu)完整,但因偏酸,對抗原 有一定損害,且組織收縮明顯,不適于組織標本的長期保存。 PLP液:即高碘酸鈉-賴氨酸-多聚甲醛,適于固定石蠟切片。適于富含糖類組織,對超微結(jié)構(gòu)及許多抗原的抗原性保存較好。

2 .組織脫水,透明 :時間不能太長,否則在切片時容易碎片,切不完整。

3 .切片時展片: 有些組織在切片后難以在水中展開,這時可適當?shù)卦谒屑尤霂椎我掖肌?/p>

4 .烤片: 60℃ 30分鐘或37℃ 24小時,溫度太高或時間太長,抗原 容易丟失。

5 .蠟塊及切片的保存: 好在4℃保存

6 .脫片問題 : Poly-L-Lysine(多聚賴氨酸)為目前免疫組化 染色工作中常用的一種防脫片劑,6ml的多聚賴氨酸溶液可按1:10稀釋成60ml的工作液,適合于需要酶消化、微波、高溫高壓的防脫片處理。如不行,可用雙重處理(APES和Poly-L-Lysine)的切片。在以上兩種條件都行不通的情況下,可用如下方法:切片在脫蠟前,放在APES 1:50 丙酮溶液中浸泡3分鐘,晾干,即可進行下一步。

7 .滅活內(nèi)源性酶: HRP系統(tǒng):3%雙氧水滅活;AP系統(tǒng):3%HAc滅活。

8 .暴露抗原 : 對于石蠟切片的免疫組化實驗時,必須采用高溫加熱抗原修復,這將有助于暴露抗原決定簇,從而增加免疫組化染色的強度(不同抗體的佳修復液請參閱抗體說明書)。對于不同的組織,不同的抗原,不同的抗體,所采用的方法應(yīng)不一樣,可進行熱修復、胰酶消化、既不修復也不消化。膠原還可以用胃蛋白酶消化等。

9 .封閉: 在山羊血清封閉,非特異性染色仍然較強時,可延長封閉時間或用濃縮血清封閉

10 .抗體稀釋: 應(yīng)遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配”的原則,對于PBS稀釋的抗體一定要當天使用。

11 .背景高: 在抗體濃度、反應(yīng)時間、反應(yīng)溫度等合適的條件下,如果背景依舊高,可采用含1‰ Tween20的PBS洗,特別是在顯色之前要多洗。

12 .返藍: 在蘇木素復染后,可用堿性緩沖液(如PBS)或Na2HPO4的飽和溶液返藍。

13 .顯色: 一定要在顯微鏡下觀察,注意控制背景。

14. 在整個操作過程中,切片千萬不能干燥,否則會有非特異性染色。

版權(quán)所有  ICP備案號: 管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)   總流量:938859  網(wǎng)站地圖

精品国产综合区久久久久久| 国产老熟妇精品观看| 香蕉久久久久久AV成人| 人妻人人做人做人人爱| 欧美性受xxxx黑人xyx性爽| 久久精品国产久精国产果冻传媒 | 老牛嫩草一区二区三区| 欧美国产成人精品一区二区三区 | 国产一区二区精品久久岳| 欧美bbwhd老太大| 免费国产黄网站在线观看可以下载| 无码精品av久久久奶水| 亚洲精品国产第一综合99久久| 日本XXXX高清色视频在线播放 | 精品乱码一区二区三区四区| 日本少妇人妻xxxxx18免费| 欧美性受xxxx| 亚洲精品美女久久7777777| 久久久av精品波多野结衣| 亚洲在线视频| 性少妇FREESEXVIDEOS高清| 被强到爽的邻居人妻完整版 | 拔萝卜视频免费看高清| 一本一道久久a久久精品综合| 亚洲一区二区三区无码国产| 久久国语露脸国产精品电影| 国产精品爱久久久久久久| 国内精品久久久久久99蜜桃| 日本妇人成熟a片免费现看| 久久久久亚洲av无码专区桃色| 国产69精品久久久久人妻 | 欧美性稚交6-12| 《超大爆乳护士》在线观看| 精品久久久久久无码免费| 国产在线精品一区二区三区不卡| 4399在线观看韩国电影| g片男a同志y免费网站| 精品无码久久久久国产动漫3D | 青草久久欧美又黑又粗又大| 日本高清色www在线观看视频| 国产精品后入内射日本在线观看|