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胰蛋白酶消化液的作用用途及使用方法
胰蛋白酶消化液的作用用途及使用方法
  胰蛋白酶消化液 為蛋白酶的一種,EC 3.4.4.4,是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動物中,作為消化酶而起作用。在胰臟是作為酶的前體胰蛋白酶原而被合成的。作為胰液的成分而分泌,受腸激酶,或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶,是肽鏈內切酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側切斷。它不僅起消化酶的作用,而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體,起活化作用。是特異性強的蛋白酶,在決定蛋白質的氨基酸排列中,它成為*的工具。
  作用與用途
  胰蛋白酶消化液能選擇地水解蛋白質中由賴氨酸或精氨酸的羧基所構成的肽鏈,能消化溶解變性蛋質,對未變性的蛋白質無作用,因此,能使膿、痰液、血凝塊等分解、變稀,易于引流排除,加速創(chuàng)面凈化,促進肉芽組織新生,此外還有抗炎癥作用。
  臨床上用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷、瘺管等所產生的局部水腫、血腫及膿腫等。噴霧吸入,用于呼吸道疾病。也可用于治療毒蛇咬傷。還常用于動物細胞培養(yǎng)前對組織的處理。
  劑量與用法
  肌內注射,1 000~2 000U或5 000U用生理鹽水或注射用水溶解,1次/日。治毒蛇咬傷,取本品2 000U,1~3支,加0.25%~0.5%鹽酸普魯卡因液(或注射用水)4ml~20ml溶解,以牙痕為中心,在傷口周圍作浸潤注射。或在腫脹部位上方作環(huán)形封閉1~2次,如病情需要可重復使用。
  副作用
  1、寒戰(zhàn)、發(fā)熱、頭痛、頭暈、胸痛及腹痛、腹瀉等。
  2、不可用于急性炎癥及出血空腔中。
  3、肝、腎損傷、血凝異常和有出血傾向者忌用。
  胰蛋白酶消化液使用方法:
  1. 貼壁細胞的消化:
  a) 吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
  b) 加入少量胰蛋白酶消化液,蓋過細胞即可,室溫放置1-2 分鐘。不同的細胞消化時間有所不同,對于貼
  壁牢固的細胞可適當延長消化時間。
  c) 顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍
  吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除消化液。加入含血清的細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接
  用于后續(xù)實驗。
  d) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
  e) 如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細
  胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g 離心1 分鐘,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清
  的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
  2. 組織的消化:
  不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

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