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胰蛋白酶消化液的作用用途及使用方法
胰蛋白酶消化液的作用用途及使用方法
  胰蛋白酶消化液 為蛋白酶的一種,EC 3.4.4.4,是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動(dòng)物中,作為消化酶而起作用。在胰臟是作為酶的前體胰蛋白酶原而被合成的。作為胰液的成分而分泌,受腸激酶,或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶,是肽鏈內(nèi)切酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切斷。它不僅起消化酶的作用,而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體,起活化作用。是特異性強(qiáng)的蛋白酶,在決定蛋白質(zhì)的氨基酸排列中,它成為*的工具。
  作用與用途
  胰蛋白酶消化液能選擇地水解蛋白質(zhì)中由賴氨酸或精氨酸的羧基所構(gòu)成的肽鏈,能消化溶解變性蛋質(zhì),對(duì)未變性的蛋白質(zhì)無作用,因此,能使膿、痰液、血凝塊等分解、變稀,易于引流排除,加速創(chuàng)面凈化,促進(jìn)肉芽組織新生,此外還有抗炎癥作用。
  臨床上用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷、瘺管等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫及膿腫等。噴霧吸入,用于呼吸道疾病。也可用于治療毒蛇咬傷。還常用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前對(duì)組織的處理。
  劑量與用法
  肌內(nèi)注射,1 000~2 000U或5 000U用生理鹽水或注射用水溶解,1次/日。治毒蛇咬傷,取本品2 000U,1~3支,加0.25%~0.5%鹽酸普魯卡因液(或注射用水)4ml~20ml溶解,以牙痕為中心,在傷口周圍作浸潤注射?;蛟谀[脹部位上方作環(huán)形封閉1~2次,如病情需要可重復(fù)使用。
  副作用
  1、寒戰(zhàn)、發(fā)熱、頭痛、頭暈、胸痛及腹痛、腹瀉等。
  2、不可用于急性炎癥及出血空腔中。
  3、肝、腎損傷、血凝異常和有出血傾向者忌用。
  胰蛋白酶消化液使用方法:
  1. 貼壁細(xì)胞的消化:
  a) 吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
  b) 加入少量胰蛋白酶消化液,蓋過細(xì)胞即可,室溫放置1-2 分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同,對(duì)于貼
  壁牢固的細(xì)胞可適當(dāng)延長消化時(shí)間。
  c) 顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍
  吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。此時(shí)吸除消化液。加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接
  用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
  d) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
  e) 如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細(xì)
  胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000-2000g 離心1 分鐘,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清
  的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
  2. 組織的消化:
  不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

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