鏈霉親和素（Streptavidin，SA）為Streptomyces Avicllrdi菌培養(yǎng)過程中的分泌產物。是大小為66KDa的四聚體蛋白，一分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結合，鏈霉親和素-生物素復合物的解離常數處于10^-14 mol/L數量級，是已知自然界中的非共價相互作用之一。其特別的結構特性使其廣泛應用于免疫學中ELISA檢測信號的放大。SA亦可用于免疫微孔板、免疫層析硝酸纖維素膜、基因芯片，快速固定生物素化的抗原、抗體、核酸等物質，偶聯NHS磁珠、樹脂微球，廣泛應用于發(fā)光診斷、生物素化物質分離、磁性試紙條免疫層析等方面。

01

測定包被板結合活性

1. 用200μL洗滌緩沖液沖洗預包被酶標板，每孔三次；

2. 準備1mg/mL的Bio-HRP溶液，用1:2000的稀釋度對第一孔進行1:2連續(xù)倍比稀釋，在室溫下孵育1小時；

3. 用200μL洗滌緩沖液清洗每孔4次；

4. 用100μL底物溶液室溫孵育15分鐘；

5. 加50μL終止液，測量每個孔的吸光度。

結果顯示：本公司所產SA包被板結合活性與X品牌及Y品牌平行，甚至更優(yōu)。

02

雙抗夾心法檢測

1. 用200μL的Wash Buffer洗滌預包被酶標板，每孔三次。在每孔中加入100μL生物素化捕獲抗體，在室溫振蕩孵育60分鐘；

2. 用200μL的Wash Buffer洗滌每孔四次，連續(xù)稀釋抗原，64ng/mL作為高點，同時設置0孔，每孔加100μL。在室溫振蕩孵育60分鐘；

3. 用200μL的Wash Buffer洗滌每孔四次。在每個孔中加入100μL一抗，室溫振蕩孵育60分鐘；

4. 用200μL的Wash Buffer洗滌每孔四次。每孔加入100μL酶標二抗。在室溫振蕩孵育30分鐘；

5. 用200μL的Wash Buffer洗滌每孔四次。每孔加入100μL底物溶液室溫孵育20分鐘；

6. 加50μL終止液，測量每個孔的吸光度。

結果表明：本包被板顯色更高，擬合曲線優(yōu)于X品牌及Y品牌。

03

穩(wěn)定性檢測

將包被好的SA板條放于37℃進行加速穩(wěn)定性實驗，放置16天（約4℃放置24個月），隨后取出進行結合活性檢測。

結果顯示：考核16天后，結合活性OD值變化不大且梯度良好，表明包被板穩(wěn)定性良好。