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新品早知道|人中性粒細胞分離試劑盒

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背景介紹

中性粒細胞是豐富的粒細胞類型,占人類所有白細胞的40%至70%。作為宿主抵抗入侵病原體的第一道防線,中性粒細胞具備固有的吞噬能力,可以吸收納米顆粒和吞噬死亡的紅細胞,并在激活后清除外來病原體和加載靶點;而且,還能跨血管遷移到臨近組織的能力。中性粒細胞是在瑞氏(Wright)染色血涂片中,胞質(zhì)呈無色或極淺的淡紅色,有許多彌散分布的細小的(0.2~0.4微米)淺紅或淺紫色的*顆粒。細胞核呈桿狀或2~5分葉狀,葉與葉間有細絲相連。中性粒細胞具趨化作用、吞噬作用和殺菌作用。中性粒細胞來源于骨髓,具有分葉形或桿狀的核,胞漿內(nèi)含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細顆粒。這些顆粒多是溶酶體,內(nèi)含髓過氧化酶、溶菌酶、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類,與細胞的吞噬和消化功能有關(guān)。

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圖1.中性粒細胞瑞氏

(Wright)染色圖片

注:紫色為中性粒細胞;粉色為紅細胞


產(chǎn)品介紹

作為天然免疫細胞的重要組成部分,中性粒細胞在多種疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。為了進一步探討其作用機制,常需分離人及動物外周血中性粒細胞進行研究。


市售產(chǎn)品-中性粒細胞分離試劑盒的產(chǎn)品缺點


目前,市面上大多數(shù)中性粒細胞分離試劑盒主要是根據(jù)全血中各細胞密度不同的特點,通過密度梯度離心法獲取目的細胞。在實驗過程中多存在以下問題并在一定程度上影響了實驗結(jié)果:


1. 離心時紅細胞沉降不全面,多聚集于中性粒細胞白膜層,導(dǎo)致白膜層不清晰;

2. 增加離心時間或離心力后,可以部分改善紅細胞沉降結(jié)果,但仍能明顯看到紅細胞存在于白膜層或分離液中,且白膜層出現(xiàn)彌散;

3. 收集到的中性粒細胞層混有大量紅細胞,可使用紅細胞裂解液祛除紅細胞干擾,但花費時間較長且有可能影響中性粒細胞表面抗原的表達;

4. 獲取的細胞數(shù)量少且中性粒細胞純度低。


市售產(chǎn)品-中性粒細胞分離試劑盒的分離結(jié)果展示




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圖2. 中性粒細胞分離試劑盒離心實際效果圖

(人中性粒細胞分離實驗為例)

注:中性粒細胞層有很多肉眼可見紅細胞污染

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圖3. 中性粒細胞分離吉姆薩染色結(jié)果

(人中性粒細胞分離實驗為例)


注:中性粒細胞層經(jīng)染色后涂片觀察,

圖片中紫色為中性粒細胞;

圖片中粉色為紅細胞


為了進一步優(yōu)化中性粒細胞分離效果,索萊寶研發(fā)了細胞分離專用的紅細胞沉降液(貨號R1000),采用新的“先沉降紅細胞,后進行細胞分離"的實驗方式,以較大程度降低紅細胞的污染,并且提高了中性粒細胞的純度及獲得量。


新品-中性粒細胞分離試劑盒的試劑組成

名稱

規(guī)格

保存

試劑A

200ml

常溫保存

試劑C

100ml

常溫保存

紅細胞沉降液

100ml

常溫保存

細胞洗滌液

200ml

常溫保存


新品-中性粒細胞分離試劑盒的產(chǎn)品優(yōu)勢


1. 同常規(guī)分離方案比,優(yōu)化后的方案雖然增加了沉降紅細胞的時間,但大大減少了離心時間且無需進行紅細胞裂解,故二者總用時差異不大;

2. 使用優(yōu)化方案離心后,離心管內(nèi)中性粒細胞白環(huán)層較常規(guī)更加清晰且無紅細胞聚集;

3. 優(yōu)化后中性粒細胞的純度較常規(guī)有明顯提高。


新品-中性粒細胞分離試劑盒的分離結(jié)果展示

以人中性粒細胞分離試劑盒(P9402)為例說明

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圖4. 紅細胞沉降液沉降及分離效果圖

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圖5. 中性粒細胞分離試劑盒實際效果圖


注:中性粒細胞層幾乎沒有肉眼可見紅細胞污染

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圖6. 中性粒細胞分離試劑盒染色結(jié)果


注:中性粒細胞層有極少紅細胞污染,

中性粒細胞純度可以到90%至95%。


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