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小科普|實驗病理學技術(shù)—脫水、透明、浸蠟、包埋篇


同學們,上次聊到實驗病理組織的固定。接下來讓我們一口氣說說脫水、透明、浸蠟、包埋。


脫 水


組織在固定之后內(nèi)部仍含有大量水分,石蠟作為最后的包埋介質(zhì),而水不能與石蠟相互混合。所以先要利用乙醇作為脫水劑,將水從組織中*置換出來。但是乙醇對組織有明顯收縮作用,所以必須采用從高濃度到低濃度逐級升高的梯度乙醇來脫水。


透 明


脫水完畢的組織塊,常用二甲苯作為能與乙醇融合同時又能溶解石蠟的媒介劑,將乙醇從組織中置換出來,達到石蠟浸入組織的最終目的。此過程中,媒介劑進入組織內(nèi)其光折射指數(shù)接近于細胞蛋白的折光指數(shù),使整個組織變得透亮,此過程稱為透明。


浸 蠟


組織經(jīng)過脫水透明后,要在熔化的石蠟包埋劑里面浸漬,稱為浸蠟。一般需經(jīng)過2-3次浸蠟過程才能完成。


包 埋


浸蠟后的組織塊和熔化石蠟固定稱為均一硬度易于切片的過程,即為包埋。


注意事項

1.脫水、透明、浸蠟、包埋中所有試劑需要記錄使用次數(shù)和脫水組織塊數(shù)量,定期更換;

2.不同臟器組織脫水程序會有所不同,需經(jīng)實驗摸索得到適合的脫水程序;

3.組織與包埋盒底部要貼平,使組織與蠟之間不留空隙;

4.包埋時候應注意包埋方向。一般肝、腎、腫瘤等選擇組織最大面進行包埋,但是對于一些需要分別觀察橫截面和縱截面的組織,需事先確定好觀察方向。


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