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小科普|實(shí)驗(yàn)病理學(xué)技術(shù)—脫水、透明、浸蠟、包埋篇


同學(xué)們,上次聊到實(shí)驗(yàn)病理組織的固定。接下來(lái)讓我們一口氣說(shuō)說(shuō)脫水、透明、浸蠟、包埋。


脫 水


組織在固定之后內(nèi)部仍含有大量水分,石蠟作為最后的包埋介質(zhì),而水不能與石蠟相互混合。所以先要利用乙醇作為脫水劑,將水從組織中*置換出來(lái)。但是乙醇對(duì)組織有明顯收縮作用,所以必須采用從高濃度到低濃度逐級(jí)升高的梯度乙醇來(lái)脫水。


透 明


脫水完畢的組織塊,常用二甲苯作為能與乙醇融合同時(shí)又能溶解石蠟的媒介劑,將乙醇從組織中置換出來(lái),達(dá)到石蠟浸入組織的最終目的。此過(guò)程中,媒介劑進(jìn)入組織內(nèi)其光折射指數(shù)接近于細(xì)胞蛋白的折光指數(shù),使整個(gè)組織變得透亮,此過(guò)程稱(chēng)為透明。


浸 蠟


組織經(jīng)過(guò)脫水透明后,要在熔化的石蠟包埋劑里面浸漬,稱(chēng)為浸蠟。一般需經(jīng)過(guò)2-3次浸蠟過(guò)程才能完成。


包 埋


浸蠟后的組織塊和熔化石蠟固定稱(chēng)為均一硬度易于切片的過(guò)程,即為包埋。


注意事項(xiàng)

1.脫水、透明、浸蠟、包埋中所有試劑需要記錄使用次數(shù)和脫水組織塊數(shù)量,定期更換;

2.不同臟器組織脫水程序會(huì)有所不同,需經(jīng)實(shí)驗(yàn)摸索得到適合的脫水程序;

3.組織與包埋盒底部要貼平,使組織與蠟之間不留空隙;

4.包埋時(shí)候應(yīng)注意包埋方向。一般肝、腎、腫瘤等選擇組織最大面進(jìn)行包埋,但是對(duì)于一些需要分別觀察橫截面和縱截面的組織,需事先確定好觀察方向。


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