在微生物培養(yǎng)過(guò)程中,存在關(guān)于LB培養(yǎng)基倒置的原因主要是為了干燥培養(yǎng)基板并促進(jìn)諸如條紋和涂覆的操作。接種后倒置是為了防止滴落并破壞菌落形態(tài)。 實(shí)際上,這種影響是淺現(xiàn)的,換句話(huà)說(shuō),如果不加以管理,它會(huì)很長(zhǎng)很丑,而且無(wú)法計(jì)算菌落的數(shù)量。
從以上分析可以看出,該問(wèn)題的要點(diǎn)如下:①防止培養(yǎng)基蓋上的水滴落入介質(zhì)中②避免介質(zhì)中水分過(guò)度揮發(fā)③容易拿取④方便計(jì)數(shù)。
倒置培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí),由于培養(yǎng)基中的空氣不易流動(dòng),因此可以盡可能地減少外來(lái)細(xì)菌的感染,并且可以避免細(xì)菌對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)物的污染。 通過(guò)實(shí)驗(yàn)觀察,發(fā)現(xiàn)如果將培養(yǎng)基以正確的方向放置,則容易在培養(yǎng)基周?chē)L(zhǎng)受污染的細(xì)菌菌落。
當(dāng)培養(yǎng)條件需要通風(fēng)時(shí),倒置培養(yǎng)基可以減少培養(yǎng)基表面的空氣流量,減慢培養(yǎng)基中水的蒸發(fā),將水保持在瓊脂等固體培養(yǎng)基中,并充分保持培養(yǎng)基的彈性。 瓊脂等凝結(jié)劑,延長(zhǎng)介質(zhì)破裂的時(shí)間,因此,反向培養(yǎng)有利于細(xì)菌的繁殖和存活。如果將培養(yǎng)基垂直放置,則介質(zhì)將在幾天內(nèi)流失水分并破裂,可以看出,在栽培過(guò)程中防止水分流失非常重要。
打開(kāi)培養(yǎng)箱以取出并放置培養(yǎng)基時(shí),很容易將意外放置的培養(yǎng)基的蓋子敲開(kāi),雖然倒置的培養(yǎng)基在取下時(shí)可以保持其原始形狀,但不容易將盤(pán)子的底部與蓋子分開(kāi),從而避免了環(huán)境中細(xì)菌的污染。
在將培養(yǎng)基倒置之后,由于培養(yǎng)基仍然具有殘留溫度并且剛剛凝固,因此水含量相對(duì)較高并且濕度相對(duì)較高,并且一些水滴落在盤(pán)蓋上。如果放置培養(yǎng)基,冷凝的水滴將流入培養(yǎng)基中,這不僅會(huì)造成污染,而且還會(huì)使培養(yǎng)基與培養(yǎng)基分離,從而易于滑動(dòng)。這是培養(yǎng)基不能牢固粘附的原因之一。如果鋪培養(yǎng)基時(shí)培養(yǎng)基中的水份很大,在接種和培養(yǎng)過(guò)程中,培養(yǎng)基中的細(xì)菌會(huì)四處流動(dòng),并且已生長(zhǎng)的細(xì)菌膜將連接在一起,無(wú)法計(jì)數(shù)。
LB培養(yǎng)基培養(yǎng)的主要目的是分離單細(xì)胞菌落,以便于觀察和鑒定,將培養(yǎng)基倒置可以防止冷凝水滴落到培養(yǎng)基上,并避免被細(xì)菌污染,它也有利于細(xì)菌種類(lèi)的生長(zhǎng),繁殖和計(jì)數(shù)。