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如何選擇符合實(shí)驗(yàn)要求的ELISA試劑盒?
   ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。ELISA試劑盒在選購(gòu)時(shí)應(yīng)注意以下幾個(gè)方面:

  1、明確研究種屬:一般來(lái)說(shuō),廠家都會(huì)在產(chǎn)品名稱(chēng)上標(biāo)明種屬,且為*個(gè)單詞,檢索種屬的常用語(yǔ)言為英文。

  2、明確樣本類(lèi)型:不同廠家驗(yàn)證樣本類(lèi)型不同,即使同一廠家不同試劑盒,其驗(yàn)證樣本類(lèi)型也不盡相同。特別是復(fù)雜的血漿樣本,因此購(gòu)買(mǎi)前需仔細(xì)核對(duì)。

  3、會(huì)預(yù)測(cè)自己的目標(biāo)因子的濃度:一般來(lái)說(shuō),待測(cè)因子可以根據(jù)經(jīng)驗(yàn)或資料獲得參考的檢測(cè)范圍,且正常人與疾病狀態(tài)存在差異。因而,必要時(shí)進(jìn)行樣本的稀釋及選擇合適檢測(cè)范圍的試劑盒極其重要。

  4、檢查試劑盒進(jìn)行過(guò)哪些質(zhì)控質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)在說(shuō)明書(shū)中即可找到,在購(gòu)買(mǎi)前檢查試劑盒是否進(jìn)行過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)控實(shí)驗(yàn),包括批次內(nèi)(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實(shí)驗(yàn)、線性稀釋實(shí)驗(yàn)及交叉反應(yīng)測(cè)試等,每個(gè)數(shù)據(jù)最好都看一下,確保*的結(jié)果重現(xiàn)性及準(zhǔn)確性。

  5、需檢測(cè)的因子數(shù)量如果待測(cè)因子超過(guò) 5 個(gè),且樣本量較小時(shí),單因子 ELISA 檢測(cè)方法并不是好的選擇。建議考慮多因子檢測(cè)方法,可節(jié)約樣本及時(shí)間成本,也可保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。

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