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如何選擇符合實驗要求的ELISA試劑盒?
   ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。ELISA試劑盒在選購時應(yīng)注意以下幾個方面:

  1、明確研究種屬:一般來說,廠家都會在產(chǎn)品名稱上標(biāo)明種屬,且為*個單詞,檢索種屬的常用語言為英文。

  2、明確樣本類型:不同廠家驗證樣本類型不同,即使同一廠家不同試劑盒,其驗證樣本類型也不盡相同。特別是復(fù)雜的血漿樣本,因此購買前需仔細(xì)核對。

  3、會預(yù)測自己的目標(biāo)因子的濃度:一般來說,待測因子可以根據(jù)經(jīng)驗或資料獲得參考的檢測范圍,且正常人與疾病狀態(tài)存在差異。因而,必要時進(jìn)行樣本的稀釋及選擇合適檢測范圍的試劑盒極其重要。

  4、檢查試劑盒進(jìn)行過哪些質(zhì)控質(zhì)控數(shù)據(jù)在說明書中即可找到,在購買前檢查試劑盒是否進(jìn)行過嚴(yán)格的質(zhì)控實驗,包括批次內(nèi)(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實驗、線性稀釋實驗及交叉反應(yīng)測試等,每個數(shù)據(jù)最好都看一下,確保*的結(jié)果重現(xiàn)性及準(zhǔn)確性。

  5、需檢測的因子數(shù)量如果待測因子超過 5 個,且樣本量較小時,單因子 ELISA 檢測方法并不是好的選擇。建議考慮多因子檢測方法,可節(jié)約樣本及時間成本,也可保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確。

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