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線粒體提取試劑盒的使用注意事項
  線粒體提取試劑盒用于從動物細胞或組織中分離出完整而純化的線粒體。適合于動物軟組織(肝或腦組織)和硬組織(肌肉)以及培養(yǎng)細胞的線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高,可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。

  線粒體提取試劑盒在使用時應(yīng)注意以下事項:

  1.為保證獲得完整的線粒體,第一是全程低溫操作。第二是快速。第三,在不破壞亞細胞器的情況下破碎細胞是制備線粒體的最關(guān)鍵環(huán)節(jié)。與組織塊相比,培養(yǎng)細胞特別是貼壁培養(yǎng)細胞在用玻璃勻漿器勻漿時較難破壁,因而要選用小容量玻璃勻漿器、間隙嚴密的研杵上下研磨培養(yǎng)細胞。
  2.以離心力g計算正確的離心速度,不同的離心機可據(jù)此精確計算離心速度。
  3.進行Western Blot和2D-膠電泳,可直接加入上樣緩沖液裂解線粒體。

  4.盡量使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

  5.避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

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