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線粒體提取試劑盒的使用注意事項
  線粒體提取試劑盒用于從動物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的線粒體。適合于動物軟組織(肝或腦組織)和硬組織(肌肉)以及培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高,可以被用于細(xì)胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。

  線粒體提取試劑盒在使用時應(yīng)注意以下事項:

  1.為保證獲得完整的線粒體,第一是全程低溫操作。第二是快速。第三,在不破壞亞細(xì)胞器的情況下破碎細(xì)胞是制備線粒體的最關(guān)鍵環(huán)節(jié)。與組織塊相比,培養(yǎng)細(xì)胞特別是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞在用玻璃勻漿器勻漿時較難破壁,因而要選用小容量玻璃勻漿器、間隙嚴(yán)密的研杵上下研磨培養(yǎng)細(xì)胞。
  2.以離心力g計算正確的離心速度,不同的離心機(jī)可據(jù)此精確計算離心速度。
  3.進(jìn)行Western Blot和2D-膠電泳,可直接加入上樣緩沖液裂解線粒體。

  4.盡量使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

  5.避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

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