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想做免疫熒光不會細(xì)胞爬片怎么行?

我們在檢測細(xì)胞蛋白定位或凋亡時(TUNEL),免不了要制作細(xì)胞爬片,細(xì)胞爬片的質(zhì)量會影響最后的圖片呈現(xiàn)效果及實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。今天小編教大家如何制作更好的細(xì)胞爬片。

★ ★ ★

 

(一)爬片準(zhǔn)備

1、爬片最好選用專用玻片。避免自己裁剪大小不一,以及玻璃的透明程度和吸附性都會影響最后的圖片效果。

2、根據(jù)自己的需要選擇合適大小的爬片,如6孔板、12孔板、24孔板。

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品貨號

TC處理細(xì)胞爬片6孔板用

YA0352

TC處理細(xì)胞爬片12孔板用

YA0351

TC處理細(xì)胞爬片24孔板用

YA0350

3、選擇好孔板和爬片,用鑷子將爬片小心放到孔板中,注意無菌操作。放入玻片前,注意向孔板中滴加少量培養(yǎng)基,再放入玻片。目的是使培養(yǎng)皿與玻片間有更好的粘合力,避免出現(xiàn)在加入細(xì)胞懸液時玻片飄起,引起雙層細(xì)胞貼片。

(二)細(xì)胞準(zhǔn)備

1、如果是原代細(xì)胞,細(xì)胞分化時間較長,細(xì)胞分化好在進行接種,不要在孔板里進行分化。

2、如果是傳代細(xì)胞,需胰酶消化細(xì)胞后對細(xì)胞計數(shù),計算好鋪孔密度重懸到培養(yǎng)基中。

3、根據(jù)自己的需求,將計算好的細(xì)胞,鋪到孔板中。注意細(xì)胞不要太密,會影響后面拍照效果。

4、待細(xì)胞貼壁,可根據(jù)實驗需要正常進行后面的藥物干預(yù)等試驗。

5、細(xì)胞實驗結(jié)束后需要及時固定細(xì)胞來進行免疫熒光實驗,避免細(xì)胞再進行代謝反應(yīng)或死亡。

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品貨號

胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 

不含酚紅

T1300

胰蛋白酶消化液(0.25%) 

不含EDTA和酚紅

T1350

4%組織細(xì)胞固定液

P1110

 

北京索萊寶目前具有現(xiàn)貨單克隆和多克隆一抗一萬一千余種,基本涵蓋所有內(nèi)參、標(biāo)簽和熱門信號通路。現(xiàn)貨標(biāo)記二抗近百種。所有抗體均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)檢,驗證實驗包括ICC/IF等。

 

驗證結(jié)果展示

抗體驗證平臺

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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