elisa試劑盒出現(xiàn)誤差的情況不在少數(shù)，那具體是什么會(huì)導(dǎo)致elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)誤差呢?接下來大家一起來探討了解一下。
一、肉眼調(diào)查稍顯色，酶標(biāo)儀打印為陰性的標(biāo)本在實(shí)踐工作中是難以避免的，肉眼目測成果不可靠，應(yīng)以酶標(biāo)儀判讀為準(zhǔn)。
二、不同的elisa試劑盒廠家,產(chǎn)品其生產(chǎn)工藝和操作方法會(huì)略有不同，必須依照所用試劑盒嚴(yán)格操作，不然容易發(fā)生檢測成果的不確定性。
三、加樣時(shí)樣品量差錯(cuò)，關(guān)于陰或很陽的標(biāo)本影響不大，但對(duì)閾值鄰近的標(biāo)本影響極大，主張校正加樣器。
四、由陰性變?yōu)閺?qiáng)陽性原因多為操作過程中漏加試劑等有關(guān)。
五、臨界值鄰近標(biāo)本動(dòng)搖為正常現(xiàn)象，任何elisa試劑盒均不可避免。能夠考慮將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。
elisa實(shí)驗(yàn)的八個(gè)細(xì)節(jié)：
1. 在收到試劑盒后，為保證檢測效果，需要根據(jù)說明書中保存條件正確儲(chǔ)存。除非特別注明，試劑盒大多是在2～8°C條件下儲(chǔ)存。
2. 在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，請(qǐng)確認(rèn)包裝中的試劑盒成分與說明書一致，再進(jìn)行后續(xù)操作。
3. 溶解標(biāo)準(zhǔn)品過程中，注意標(biāo)準(zhǔn)品是否受潮，過程中要避免產(chǎn)生泡沫。
4. 為了避免交叉污染，配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽。
5. 每次孵育時(shí)，正確使用封板膠紙可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
6. 正確洗板有助于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性。
7. TMB顯色底物在上板前應(yīng)為無色，請(qǐng)避光保存。加入孔板后，將由無色變成不同程度的藍(lán)色。
8. 終止液上板順序需與底物上板順序一致，加入終止液，溶液顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色。如果出現(xiàn)綠色，即表明終止液與底物未混勻，請(qǐng)充分混合。
