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什么會導(dǎo)致elisa試劑盒實驗出現(xiàn)誤差?

更新時間:2021-05-21點擊次數(shù):766
  elisa試劑盒出現(xiàn)誤差的情況不在少數(shù),那具體是什么會導(dǎo)致elisa試劑盒實驗出現(xiàn)誤差呢?接下來大家一起來探討了解一下。
 
  一、肉眼調(diào)查稍顯色,酶標(biāo)儀打印為陰性的標(biāo)本在實踐工作中是難以避免的,肉眼目測成果不可靠,應(yīng)以酶標(biāo)儀判讀為準(zhǔn)。
 
  二、不同的elisa試劑盒廠家,產(chǎn)品其生產(chǎn)工藝和操作方法會略有不同,必須依照所用試劑盒嚴(yán)格操作,不然容易發(fā)生檢測成果的不確定性。
 
  三、加樣時樣品量差錯,關(guān)于陰或很陽的標(biāo)本影響不大,但對閾值鄰近的標(biāo)本影響極大,主張校正加樣器。
 
  四、由陰性變?yōu)閺?qiáng)陽性原因多為操作過程中漏加試劑等有關(guān)。
 
  五、臨界值鄰近標(biāo)本動搖為正?,F(xiàn)象,任何elisa試劑盒均不可避免。能夠考慮將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。
 
  elisa實驗的八個細(xì)節(jié):
 
  1. 在收到試劑盒后,為保證檢測效果,需要根據(jù)說明書中保存條件正確儲存。除非特別注明,試劑盒大多是在2~8°C條件下儲存。
 
  2. 在實驗進(jìn)行前,請確認(rèn)包裝中的試劑盒成分與說明書一致,再進(jìn)行后續(xù)操作。
 
  3. 溶解標(biāo)準(zhǔn)品過程中,注意標(biāo)準(zhǔn)品是否受潮,過程中要避免產(chǎn)生泡沫。
 
  4. 為了避免交叉污染,配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。
 
  5. 每次孵育時,正確使用封板膠紙可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
 
  6. 正確洗板有助于實驗結(jié)果的穩(wěn)定性。
 
  7. TMB顯色底物在上板前應(yīng)為無色,請避光保存。加入孔板后,將由無色變成不同程度的藍(lán)色。
 
  8. 終止液上板順序需與底物上板順序一致,加入終止液,溶液顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色。如果出現(xiàn)綠色,即表明終止液與底物未混勻,請充分混合。

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