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如何校正ELISA試劑盒實驗中的錯誤?
  ELISA試劑盒有許多實驗操作步驟,新手操作難免出錯。其中許多錯誤是由不充分的細(xì)節(jié)造成的。有很多方法可以減少這種錯誤,比如在做實驗時少說話,以防止唾液掉進酶的標(biāo)簽中。當(dāng)然,我們也要學(xué)會探索自己的問題,找出原因。那么,我們?nèi)绾胃倪MELISA試劑盒實驗中的錯誤呢?
 
  1、評價試劑的實用性:試劑的穩(wěn)定性對準(zhǔn)確度非常重要。在啟用試劑盒之前,應(yīng)重復(fù)檢測陰性和陽性對照品和樣品,試劑僅在試劑符合要求后才能使用。
 
  2、操作前仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說明書:嚴(yán)格按照說明書要求進行標(biāo)準(zhǔn)化操作。不同批號的試劑不混合。值得改進的是,只有經(jīng)過反復(fù)的試驗,如洗盤的數(shù)量,才能加以改進。
 
  3、加樣要準(zhǔn)確、快速:樣品添加的不準(zhǔn)確度和酶制劑用量的不確定度直接影響顯色效果。此外,顯色深度和A值的確定與顯色劑和最終液體的加入量有關(guān),因此樣品的裝載應(yīng)謹(jǐn)慎。需要在一定時間內(nèi)完成采樣的實驗,如果采樣速度慢,會出現(xiàn)誤差,試劑會暴露很長時間,特別是當(dāng)室溫過高時,保質(zhì)期會縮短甚至失效。
 
  4、檢驗技術(shù)人員應(yīng)具備實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗:檢測技術(shù)人員能夠熟練操作實驗儀器儀表,具有一定的總結(jié)和分析問題的能力,能及時、妥善地解決試劑盒實驗中出現(xiàn)的意外情況。
 
  5、洗滌要*:洗版不*,酶偶聯(lián)物的背景顏色為假陽性。此外,清潔劑應(yīng)該是新鮮的,可以隨時使用。舊的洗滌劑會增加背景,也可能出現(xiàn)假陽性。
 
  6、嚴(yán)控ELISA試劑盒實驗反應(yīng)時間:試劑盒反應(yīng)時間過長,酶被滅活,反應(yīng)時間過短,酶與血清中的微生物抗原和抗體不能*結(jié)合,產(chǎn)物結(jié)構(gòu)松散不穩(wěn)定,易清洗,易產(chǎn)生假陰性。
 

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