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ELISA試劑盒用直接法測定抗體時(shí)為什么要加酶標(biāo)抗抗體呢?
  在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,用直接法測定抗體,不能直接用酶符號(hào)測定抗體,然后直接加入底物。而要加酶標(biāo)抗抗體呢?
 
  如果將酶符號(hào)應(yīng)用于待測抗體,直接法比經(jīng)典法更復(fù)雜,在探索符號(hào)條件時(shí),不能保證抗體因誤操作而失活;酶標(biāo)二抗目前已較為常見,被規(guī)模化生產(chǎn),購買后使用方便。如果你直接做好了,方法已經(jīng)優(yōu)化了,d一抗二抗顯色,總時(shí)間加起來,結(jié)果不會(huì)超過2到3小時(shí)。
 
  可以使用直接ELISA法,即抗體包板用來在抗原上標(biāo)記酶,然后顯色,這與直接方法相比,減少了一步的時(shí)間,縮短了時(shí)間。然而,直接法和直接法各有優(yōu)缺點(diǎn),其要求取決于實(shí)驗(yàn)的具體要求。
 
  1、要檢測的抗體通常是免疫后產(chǎn)生的抗體。其中有免疫功能衰竭、抗體過少等因素存在。酶符號(hào)的使用存在許多不確定因素,如在使用酶符號(hào)之前無法測量效價(jià)的可能性,這會(huì)導(dǎo)致不必要的混淆。
 
  2、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中酶聯(lián)抗體與抗體結(jié)合后,ELISA試劑盒具有很強(qiáng)的信號(hào)放大作用,可使信號(hào)擴(kuò)增一千倍以上,適用于低抗體含量的測定。
 
  3、直接酶標(biāo)記抗體在篩選出單克隆抗體后可以考慮,但測定系統(tǒng)的建立需要大量的工作。
 
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