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使用DAB顯色試劑盒要先看的知識(shí)有哪些?
  DAB顯色試劑盒由DAB色原、DAB底物緩沖液、多聚合物過氧化氫酶 組成。 DAB,即3,3-N-DiaminobenzidineTertrahydrochloride,是辣根過氧化物酶*敏感、常用的底物。在辣根過氧化物酶的催化下,DAChemicalbookB會(huì)產(chǎn)生棕色沉淀。該棕色沉淀不溶于水、乙醇和二甲苯。因此,在DAB顯色后,還可使用溶于乙醇的染料進(jìn)行后續(xù)的染色。過氧化物酶使底物發(fā)生反應(yīng),于反應(yīng)部位產(chǎn)生棕色沉淀物。DAB顯色試劑盒可用于細(xì)胞或組織在免疫組化或原位雜交時(shí)結(jié)合的辣根過氧化物酶顯色。在使用時(shí)的注意事項(xiàng)有:

1.顯色時(shí)間嚴(yán)格控制,非常小心,一般10 分鐘左右。以免造成過度顯色,而且顯色后數(shù)小時(shí)將會(huì)褪色;

2.請(qǐng)使用完后,將反應(yīng)液,溶液A溶液C的蓋子旋緊,以防止溶液揮發(fā)和與空氣中的成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng);

3.DAB溶液應(yīng)低溫密封保存。如有結(jié)晶析出,應(yīng)確保結(jié)晶*溶解再行使用;

4.顯色工作液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配,新鮮配制的工作液應(yīng)為無色或淺棕色,如顏色過深,請(qǐng)勿使用;

5.顯色時(shí)間嚴(yán)格控制,根據(jù)情況調(diào)整,以免顯色過度。固相膜顯色數(shù)小時(shí)后即會(huì)褪色,不能長(zhǎng)時(shí)間存在;

6.DAB 為可疑致癌物,請(qǐng)采取必要的防范措施。操作時(shí)應(yīng)戴手套,盡量避免與皮膚接觸,用后及時(shí)*沖洗,接觸 DAB的實(shí)驗(yàn)用品*好經(jīng)洗液浸泡24h 后使用。

 

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