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漆酶活性是如何檢測(cè)的?
  漆酶是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強(qiáng)的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測(cè)方面有非常廣泛的應(yīng)用。酶液的提取步驟:

  1、細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(10*個(gè)) :提取液體積(ml) 為500-1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率30% 或300W,超聲3s,間隔7s,總時(shí)間3min),12000g 4C離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

  2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(ml) 為1:5-10 的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿; 1000g 4C離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

  3、 培養(yǎng)液:直接待檢。

  漆酶活性檢測(cè)試劑盒測(cè)定漆酶活性是利用漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS,測(cè)定ABTS自由基的增加速率,可計(jì)算得漆酶活性。

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