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  • 教你成為平淡無(wú)奇的WB小能手—凝膠制備

    2021-02-26 WB實(shí)驗(yàn)流程●樣本采集保存,蛋白提取相關(guān)知識(shí),請(qǐng)●蛋白定量和蛋白變性相關(guān)知識(shí),請(qǐng)現(xiàn)在正式進(jìn)入跑膠環(huán)節(jié),這一次,讓小編帶您總結(jié)一下制膠相關(guān)的知識(shí)點(diǎn):SDS-凝膠電泳系統(tǒng)采用的是不連續(xù)性系統(tǒng),上層為濃縮膠(或積層膠),下層為分離膠,先配制分離膠,濃縮膠pH6.8,可以通過(guò)甘氨酸和和氯離子之間形成的電壓對(duì)蛋白樣品產(chǎn)生壓縮,從而使蛋白樣品壓成一條狹窄的條帶,處于同一條線(xiàn)上;分離膠pH8.8,與甘氨酸的pka接近,從而使不同分子量的蛋白產(chǎn)生不同的泳動(dòng)速度,從而使不同分子量的蛋白分開(kāi)。分...
  • 乙酰膽堿酯酶測(cè)定試劑盒的測(cè)定原理是什么?

    2021-02-04 乙酰膽堿酯酶(AChE)是可將神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿(ACh)水解為乙酸和膽堿的一類(lèi)酶。AChE位于突觸間隙中,通過(guò)降解ACh來(lái)終止突觸傳遞,從而使得膽堿神經(jīng)元在激活后回復(fù)到靜息狀態(tài)。AchE活性的改變可能是由于在某些種類(lèi)的殺蟲(chóng)劑條件下暴露所造成的,在這時(shí)候這些殺蟲(chóng)劑起到了膽堿酯酶抑制劑的作用。AChE的抑制劑也可用于治療如癡呆在內(nèi)的某些疾病。乙酰膽堿酯酶測(cè)定試劑盒具有測(cè)量敏感、準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn),只需加入單一反應(yīng)試劑,然后室溫下分別在反應(yīng)后的2分鐘和10分鐘讀取儀器數(shù)據(jù)即可???..
  • 教你成為平淡無(wú)奇的WB實(shí)驗(yàn)小能手—樣本制備篇(續(xù))

    2021-01-29 WB實(shí)驗(yàn)流程樣本制備的步驟關(guān)于樣本采集和保存,蛋白提取的相關(guān)知識(shí)和技巧請(qǐng)查看:接下來(lái),讓小編帶您總結(jié)關(guān)于蛋白定量和蛋白變性相關(guān)的知識(shí)點(diǎn):一蛋白定量測(cè)定蛋白常用的方法有Bicinchoninicacid(BCA)法、Lowry法和Bradford法(考染法)1.BCA法的測(cè)定原理是蛋白質(zhì)將銅離子還原成亞銅離子,后者在堿性溶液中與BCA結(jié)合生成紫紅色結(jié)合物,該復(fù)合物在562nm處有吸光值且與蛋白質(zhì)濃度成正相關(guān)性,據(jù)此可測(cè)定蛋白質(zhì)濃度??捡R斯亮藍(lán)在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488...
  • 定位重塑型納米凝膠介導(dǎo)共遞送抗血管藥物自噬抑制劑,實(shí)現(xiàn)腫瘤的協(xié)同治療

    2021-01-29 腫瘤是一種復(fù)雜難治的疾病,對(duì)人類(lèi)健康存在重大威脅。當(dāng)腫瘤體積超過(guò)2-3mm3時(shí),腫瘤的增殖、轉(zhuǎn)移與擴(kuò)散主要依靠自身的血管系統(tǒng)來(lái)提供必要的氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。而在缺乏血管的情況下,腫瘤具有自限性生長(zhǎng)的特點(diǎn)。因此,將腫瘤血管作為靶點(diǎn),抑制它的形成或破壞其存在,直接切斷腫瘤增殖與轉(zhuǎn)移的營(yíng)養(yǎng)通道,是一個(gè)有吸引力的治療策略。目前,根據(jù)作用機(jī)制的不同,血管靶向藥物(VTAs)主要包括兩大類(lèi):血管生成抑制劑(AIs)和血管阻斷劑(VDAs)。在VDAs中,康普瑞?。–A4)作為常用的小分子血管...
  • 在使用維生素B6測(cè)定試劑盒時(shí),要注意的細(xì)節(jié)有哪些?

    2021-01-27 維生素B6(VitaminB6)又稱(chēng)吡哆素,其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺,在體內(nèi)以磷酸酯的形式存在,是一種水溶性維生素,在細(xì)胞中參與多種蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝,對(duì)生物體具有極其重要的作用。測(cè)定的原理是:維生素B6與4-氨基安替比林在強(qiáng)氧化劑作用下生成穩(wěn)定的黃色化合物,在390nm有特征吸收峰??捎糜谟糜跍y(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。維生素B6測(cè)定試劑盒在使用時(shí),要注意以下幾點(diǎn):1、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。2、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,...
  • 什么是重組人胰島素?

    2021-01-25 胰島素是由朗格漢斯胰島β細(xì)胞受內(nèi)源性或外源性物質(zhì)如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸等的刺激而分泌的一種多肽激素。重組人胰島素是將人的胰島素DNA的片段裁剪到大腸桿菌身上,讓大腸桿菌分泌出與人所分泌的一模一樣的胰島素。因?yàn)槭褂昧嘶蛑亟M技術(shù),所以也叫重組胰島素。重組人胰島素為白色或類(lèi)白色的結(jié)晶性粉,在水、乙醇中幾乎不溶,在稀鹽酸和稀氫氧化鈉溶液中易溶,是一種作用于內(nèi)分泌系統(tǒng)的降糖藥物,屬于胰島素。重組人胰島素與天然胰島素有相同的結(jié)構(gòu)和功能。重組人胰島素的作用是:調(diào)節(jié)糖代謝,同時(shí)促進(jìn)肝...
  • CCK-8試劑做實(shí)驗(yàn)時(shí)有哪些需要注意的事項(xiàng)

    2021-01-25 今天我給大家說(shuō)說(shuō)用CCK-8試劑做實(shí)驗(yàn)時(shí)的注意事項(xiàng):1.第一次做實(shí)驗(yàn)時(shí),建議先做幾個(gè)孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時(shí)間。2.接種時(shí)注意細(xì)胞懸液一定要混勻,以避免細(xì)胞沉淀下來(lái),導(dǎo)致每孔中的細(xì)胞數(shù)量不一致。3.培養(yǎng)板周?chē)蝗着囵B(yǎng)液容易揮發(fā),為減少誤差,建議培養(yǎng)板周?chē)乃倪吤靠字患优囵B(yǎng)基。4.建議采用多通道移液器,減少平行孔間的誤差,加CCK-8時(shí),建議斜貼著培養(yǎng)板壁加,不要插到培養(yǎng)基液面下加,容易產(chǎn)生氣泡,干擾OD值。5.若細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),培養(yǎng)基顏色或pH發(fā)...
  • 敲黑板 這些免疫組化FAQ助您攻破實(shí)驗(yàn)難點(diǎn)

    2021-01-22 免疫組織化學(xué)(簡(jiǎn)稱(chēng)免疫組化)是組織化學(xué)的一種,它是利用已知的特異性抗體與抗原能特異性結(jié)合的特點(diǎn),通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記于結(jié)合后的特異性抗體上的顯示劑,如酶、金屬離子、同位素等,顯示一定的顏色,并借助顯微鏡觀察其顏色的變化,從而在抗原抗體結(jié)合部位確定組織、細(xì)胞結(jié)構(gòu)的化學(xué)成份或化學(xué)性質(zhì)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程包括切片制作(固定,脫水,透明,包埋,切片,貼片,烤片),脫蠟,水化,阻斷,抗原修復(fù),封閉,一抗孵育,二抗孵育,顯色,復(fù)染,封片,分析。IHC是一項(xiàng)具有挑戰(zhàn)性的應(yīng)用技術(shù),應(yīng)用過(guò)程中常出現(xiàn)各種問(wèn)...
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