-
小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項?
2025-08-05
來源不同:胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calfserum,CS)采自出生10至14天的小牛。組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長,而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃...
-
細(xì)胞培養(yǎng) 中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?
2025-08-05
一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。如果細(xì)胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):(1)細(xì)胞生長過老,破碎的細(xì)胞殘骸;(2)血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長;(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格??蓱?yīng)...
-
胎牛血清使用中的常見問題(二)
2025-08-05
4、培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。5、為什么要熱滅活血清?加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞時,推薦使用熱滅活血清。6、有必要做熱滅活嗎?實驗顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生...
-
如何避免胎牛血清中產(chǎn)生沉淀?
2025-08-05
按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。(2)血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。(4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。(6)若必須做血清的熱滅活,請遵...
-
胎牛血清使用中的常見問題(一)
2025-08-05
1、如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。2、血清中包含絮狀...
-
Caspase-3 活性檢測原理
2025-08-04
Caspase-3是凋亡過程中最主要的終末剪切酶,因而也是研究最多的caspase,它激活pro-caspase-2,6,7,9等,特異水解多種凋亡關(guān)鍵蛋白如PARP,介導(dǎo)細(xì)胞核染色質(zhì)固縮、凋亡小體生成、核DNA斷裂。試劑盒測定原理基于Caspase-3特異水解多肽底物acetyl-Asp-Glu-Val-Aspp-nitroanilide(Ac-DEVD-pNA),釋放硝基苯胺pNA。游離硝基苯胺pNA呈黃色在405nm具有最大吸收峰,用普通可見光分光光度比色方法測定。根據(jù)...
-
微生物培養(yǎng)基使用注意事項(二)
2025-08-01
問12:培養(yǎng)基PH值為什么不在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)?答12:其實出現(xiàn)這個情況的問題有很多種,大致分為這么6大點:A、質(zhì)量不好(生產(chǎn)廠家出廠時PH就不正確)B、滅菌問題(高壓滅菌溫度過高或滅菌時間過長,導(dǎo)致葡萄糖類焦化從而PH降低)C、保存時間(超過保質(zhì)期或結(jié)塊)D、水質(zhì)出現(xiàn)問題(可以用去離子水、純化水、蒸餾水不能用礦泉水、自來水)E、保存溫度(保存溫度過高)F、光線直射以上6點都可能導(dǎo)致培養(yǎng)基PH出現(xiàn)偏差,如果出現(xiàn)此類問題,建議逐一排查,直到問題解決問13:培養(yǎng)基高壓滅菌時為什么會焦化...
-
微生物培養(yǎng)基使用注意事項(一)
2025-08-01
問01:微生物培養(yǎng)基是否有說明書?答01:微生物培養(yǎng)基一般是沒有說明書的,培養(yǎng)基中組分和使用說明都在瓶子的標(biāo)簽上。問02:微生物培養(yǎng)基的貨號是什么?答02:微生物培養(yǎng)的貨號大部分都是以LA開頭的。問03:微生物培養(yǎng)基是否可以定制?答03:微生物培養(yǎng)基的制作工藝流程比較復(fù)雜,所有目前還定制不了客戶所需要的培養(yǎng)基。問04:培養(yǎng)基pH的初步調(diào)正。答04:因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養(yǎng)基各成分充分溶解后,應(yīng)進行pH的初步調(diào)正。例如,牛肉浸液約可降低pH=0.2,而腸浸...