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關(guān)于PCR，你知道多少？（二）
2025-10-13 ----PCR反應(yīng)引物設(shè)計(jì)PCR反應(yīng)中引物起著很重要的作用。模板的不同、欲擴(kuò)增的片段不同、需要的片段長(zhǎng)度不同或者是用途不同等等，對(duì)引物的要求是不一樣的。PCR作為一種體外酶促反應(yīng)，其效率和特異性主要取決于兩個(gè)方面，一是引物和模板結(jié)合的特異性，二是多聚酶對(duì)引物的有效延伸。引物設(shè)計(jì)的總原則就是提高擴(kuò)增的效率和特異性。引物設(shè)計(jì)的原則一般遵循下列幾項(xiàng)：1、引物的長(zhǎng)度以15～30bp為宜。引物過短會(huì)使特異性降低，過長(zhǎng)則成本增加，而且也會(huì)降低特異性。常用的是18-27bp，但不應(yīng)大于38...
關(guān)于PCR，你知道多少？（一）
2025-10-13 PCR的原理多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerasechainreaction）簡(jiǎn)稱PCR技術(shù)，是近30多年發(fā)展起來的一種體外擴(kuò)增特異性DNA片段的技術(shù)，可在數(shù)小時(shí)之內(nèi)對(duì)僅有幾個(gè)拷貝的基因放大千萬倍。那么，PCR的原理是怎樣的呢？PCR技術(shù)實(shí)際上是在模板DNA、引物以及原料（四種脫氧核糖核苷酸）在適宜的反應(yīng)條件下，通過DNA聚合酶的酶促反應(yīng)完成DNA擴(kuò)增的過程。PCR技術(shù)的特異性取決于引物和模板DNA結(jié)合的特異性。PCR反應(yīng)分為三步：1）變性：通過加熱時(shí)DNA雙螺旋的氫鍵斷裂，雙...
多聚-L-賴氨酸(Poly-L-Lysine)的原理、應(yīng)用及配置
2025-10-10 多聚賴氨酸一般常見的分子量有70，000~150，000，150，000~300，000和300，000，分子量越大，黏附力越強(qiáng)，但相對(duì)充分溶解較困難。原理：多聚賴氨酸溶液是廣泛應(yīng)用的組織切片與玻片黏合劑，該多聚陽離子分子與組織切片上的陰離子相互作用會(huì)產(chǎn)生較強(qiáng)的黏合力。培養(yǎng)瓶表面的性質(zhì)對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)至關(guān)重要，細(xì)胞表面的糖蛋白（陰性）易于吸附在親水性的表面上，因而細(xì)胞培養(yǎng)表面如果有相當(dāng)含量的陽性電荷更能促進(jìn)細(xì)胞吸附，這正是運(yùn)用多聚賴氨酸優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)表面的重要所在。應(yīng)用：適用組織學(xué)...
儀器今天準(zhǔn)不準(zhǔn)？看心情？不，看TA！
2025-09-30 嘿，實(shí)驗(yàn)室的小伙伴們！是不是偶爾也會(huì)懷疑人生（哦不，是懷疑儀器）？明明步驟沒錯(cuò)，結(jié)果卻飄忽不定……儀器今天的心情，是“精準(zhǔn)模式”還是“隨緣模式”？別甩鍋儀器！90%的“不準(zhǔn)”，都是沒做對(duì)“校準(zhǔn)”——儀器就像精準(zhǔn)的鐘表，用久了難免“走偏”：滲透儀養(yǎng)細(xì)胞、測(cè)體液的科研人，滲透儀非常重要，但這臺(tái)儀器用久了就會(huì)“記錯(cuò)刻度”，導(dǎo)致檢測(cè)數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確。粘度計(jì)黏度計(jì)靠“液體流過毛細(xì)管的速度”計(jì)算結(jié)果，但管子里黏了殘留液、溫度變了點(diǎn)，速度就不準(zhǔn)了。pH計(jì)pH計(jì)的電極老化、接觸空氣久了，就會(huì)把pH...
干貨分享 | 多姿多彩的“工具人”——熒光染料，點(diǎn)亮你的科研之路
2025-09-30 熒光染料是指吸收某一波長(zhǎng)的光波后能發(fā)射出另一波長(zhǎng)大于吸收光的光波的物質(zhì)。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料是生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的工具由于靈敏度高，操作方便，逐漸取代了放射性同位素作為檢測(cè)標(biāo)記，其廣泛應(yīng)用于熒光免疫，熒光探針，細(xì)胞染色等。包括特異性的DNA染色，用于染色體分析、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡等相關(guān)研究。另有很多核酸染料在多色染色系統(tǒng)中是非常有用的復(fù)染劑，可作為背景對(duì)照，標(biāo)記細(xì)胞核使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的空間關(guān)系一目了然。Solarbio小分子系列包含了多種具有高...
高分文獻(xiàn)解讀|磷酸甘油酸脫氫酶通過穩(wěn)定蛋白激酶Cδ型mRNA促進(jìn)肝細(xì)胞癌進(jìn)展
2025-09-30 基本信息題目：PhosphoglyceratedehydrogenasestabilizesproteinkinaseCdeltatypemRNAtopromotehepatocellularcarcinomaprogression期刊：SignalTransductionａndTargetedTherapyIF:52.7PMID:40681503DOI:10.1038/s41392-025-02304-w通訊作者：汪凱、黃愛龍、唐霓通訊作者單位：重慶醫(yī)科大學(xué)文獻(xiàn)背景代謝重編...
索萊寶印度墨水使用方法
2025-09-24 印度墨水使用方法:1.取瓶?jī)?nèi)干粉39.6克，加入蒸餾水或去離子水1L，攪拌加熱煮沸至充分溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min；冷卻至50℃，搖勻倒平板。在室溫可保存一天或在冰箱里貯存數(shù)天(避光，4℃)。2.取樣品333克按MPN三管法分別取100克、10克和1克分裝在各三個(gè)2000ml、250ml和100ml的三角瓶中，在三角瓶中已裝有經(jīng)45℃預(yù)熱的9/10(樣品為1/10)的無菌蒸餾水或緩沖蛋白胨水，搖勻，在36℃培養(yǎng)18h±2h。3.各取10ml上述...
索萊寶新型植物基因組試劑盒操作步驟
2025-09-24 索萊寶植物基因組試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng)提取植物的基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司特別的新型材料，能夠高效、專一吸附DNA，可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。下面介紹植物基因組試劑盒操作步驟。操作步驟：使用前先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶體上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。1、植物組織預(yù)處理：取新鮮植物組織（不超過100mg）或干重組織（不超過20mg），于液氮中充分研磨至細(xì)粉狀...

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